骨髓间充质干细胞调控Aβ激活的小胶质细胞活性及其可能机制

【摘要】目的：小胶质细胞（microglia，MI）是脑内的免疫细胞，其功能状态与微环境相关。CD200-CD200R途径被认为是维持小胶质细胞静息状态的重要机制之一。在老龄脑中，神经元跨膜糖蛋白CD200表达减少，由于CD200-CD200R途径免疫抑制信号的减弱，在β-淀粉样蛋白（amyloidβ-peptide，Aβ）异常聚集时，MI易于过度激活而产生多种炎性因子、趋化因子，产生慢性炎症反应，促进神经元的丢失。骨髓间充质干细胞(BoneMesenchymalStemCells,BMSCs)是具有多向分化潜能的干细胞，移植BMSCs是阿尔茨海默病的潜在治疗途径之一。CD200被证实表达在骨髓间充质干细胞膜上。由此设想，抑制性免疫调控分子CD200是BMSCs治疗AD的作用机制之一。本实验通过原代培养得到人骨髓间充质干细胞和小胶质细胞，观察BMSCs上的CD200及MI的CD200R表达，以及加入抗CD200抗体能否逆转BMSCs对Aβ激活的MI的抑制，以期探讨BMSCs对于体外Aβ作用的小胶质细胞活性调控可能的新机制。方法：原代分离培养、纯化小胶质细胞、骨髓间充质干细胞，观察其形态，免疫荧光鉴定BMSCs上CD200、MI上CD200R的表达，用Aβ激活小胶质细胞，进行BMSCs和MI的体外共培养，分为MI组、BMSCs组、MI+Aβ组、MI+BMSCs组、MI+Aβ+BMSCs组、MI+Aβ+BMSCs+抗CD200抗体组，用ELISA法检测各组培养48小时后上清液中炎性因子肿瘤坏死因子-α（TumorNecrosisFactor-α，TNF-α）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、一氧化氮（Nitricoxide，NO）含量。所有统计分析均用SPSS16.0统计软件分析，P<0.05表示差异具有统计学意义。结果：培养的MI表达CD200R，BMSCs表达CD200。Aβ作用后的小胶质细胞呈阿米巴样，产生的TNF-α、IL-6、NO量较静息状态时增加（P<0.05），说明体外Aβ作用后小胶质细胞活化，BMSCs与活化的MI组共培养后TNF-α、IL-6、NO减少，差别有统计学意义（p<0.05）,加入抗CD200抗体组后小胶质细胞活化形态、炎性因子含量有所改变，较Aβ活化的MI组低，但较BMSCs和活化的MI组高，差别两两比较有统计学意义（p<0.05）。结论：BMSCs可通过CD200-CD200R接触抑制体外培养的Aβ激活的小胶质细胞的过度活化。
【作者】刘淑嘉；
【导师】董万利；
【作者基本信息】苏州大学，临床医学（专业学位），2014，硕士
【关键词】CD200-CD200R；小胶质细胞；骨髓间充质干细胞；β-淀粉样蛋白；

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